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第十九期 TSK-GEL Alpha系列色譜柱

2015年02月11日source:管理員
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TSK-GEL Alpha 系列色譜柱既可用于凝膠過(guò)濾色譜也可用于凝膠滲透色譜,能夠用來(lái)分析水溶性和脂溶性多聚物。


特點(diǎn):

獨(dú)特的親水性,聚乙烯樹(shù)脂為基材

機(jī)械穩(wěn)定性強(qiáng), 溶脹小

廣泛的溶劑使用范圍:100%水-100%非極性溶劑

TSK-GEL SuperAW 系列色譜柱和 Alpha 系列色譜柱具有相似的化學(xué)結(jié)構(gòu),粒徑和柱尺寸更小,

縮短分析時(shí)間,減少溶劑消耗,是高通量分析的首選。

以二甲基甲酰胺為流動(dòng)相,可以精確確定樣品的分子量。 其保留行為與聚苯乙烯相似。



色譜柱的清洗

要定期清洗色譜柱,清洗的頻次取決于樣品的純度。使用過(guò)程中,偶爾有一些樣品是會(huì)吸附于柱內(nèi)填充物上的,如果您正在使用的色譜柱,其某個(gè)性能指標(biāo)(如:不對(duì)稱(chēng)因子、保留時(shí)間、理論塔板數(shù)或者分離度)發(fā)生 10%或更大的變化時(shí),請(qǐng)一定要注意清洗您的色譜柱。

各種 TSK-GEL 色譜柱都附帶了驗(yàn)收?qǐng)?bào)告單和操作條件與規(guī)格說(shuō)明書(shū)。驗(yàn)收?qǐng)?bào)告單上給出了用于色譜柱性能驗(yàn)收的測(cè)試方法;操作條件和規(guī)格說(shuō)明書(shū)中給出了色譜柱的使用說(shuō)明。使用驗(yàn)收?qǐng)?bào)告單中所列舉的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行柱性能的測(cè)試,并計(jì)算樣品中的某個(gè)組份或多個(gè)組分的不對(duì)稱(chēng)因子、理論塔板數(shù)和分離度。請(qǐng)留心樣品的保留時(shí)間,因?yàn)槠鋾?huì)成為今后進(jìn)行對(duì)比的參照基準(zhǔn)。


清洗所有類(lèi)型的 TSK-GEL 液相色譜柱的基本原則

1.按照相反的流動(dòng)方向進(jìn)行色譜柱的清洗。

2.不要將色譜柱與檢測(cè)器連接。3.流速選擇為最大流速的一半,并切實(shí)進(jìn)行柱壓的監(jiān)控。

4.如果您打算使用 pH 值較高或者較低的溶液進(jìn)行柱清洗的話(huà),一定要確認(rèn)您所使用的色譜系統(tǒng)的其它部分(如:泵、泵的密封圈、進(jìn)樣器等等)是否適合。

5.使用至少 5 個(gè)色譜柱體積(5CV)的各種清洗溶液進(jìn)行清洗,各個(gè)清洗步驟之間一定要使用 5 個(gè)柱體積的超純水進(jìn)行沖洗。

6.使用您正使用的實(shí)驗(yàn)方案中的 5 個(gè)柱體積的流動(dòng)相進(jìn)行柱子的平衡。

我們?cè)诓僮鳁l件和規(guī)格說(shuō)明書(shū)中推薦了適合各種類(lèi)型的 TSK-GEL 液相色譜柱使用的清洗溶液,您可以根據(jù)柱子和樣品的種類(lèi)選擇。一般來(lái)說(shuō),低 pH 值的鹽溶液能夠清洗堿性蛋白;有機(jī)溶劑能夠清洗疏水性蛋白;尿素、界面活性劑等能夠清洗強(qiáng)吸附物質(zhì)。


清洗溶液

SW&SWxl系列色譜柱

1.pH較低(如:pH3.0)、濃度較高的鹽溶液(如:0.5MNa2SO4);2.添加水溶性有機(jī)物(MeOH、ACN、EtOH、10%-20%)的極性緩沖液;3.SDS(0.1%)、尿素(8M)或胍(6M)的緩沖溶液。注意:這些試劑很難被去除。它們需要使用 20-40 個(gè)柱體積的 20%ACN進(jìn)行沖洗。因此,只有當(dāng)先前的清洗方法無(wú)效時(shí)才選擇使用本方法。


PW&PWxl 系列色譜柱

1.高鹽極性緩沖液(如:0.5M-1.0MNa2SO4);

2.pH較低(如:2-3)或較高(如:11-12)的緩沖溶液;

3.添加水溶性有機(jī)物(MeOH、ACN、EtOH、10%-20%)的極性緩沖液;

4.SDS(0.1%)、尿素(8M)或胍(6M)的緩沖溶液。注意:這些試劑很難被去除。


SW 類(lèi)離子交換系列色譜柱

1.高鹽極性緩沖液(如:0.5M-1.0M Na2SO4);

2.較低pH值(如:2-3)的緩沖液;

3.添加水溶性有機(jī)物(MeOH、ACN、EtOH,10%-20%)的極性緩沖液;

4.添加尿素(8M)或非離子性表面活性劑的緩沖溶液。注意:這些試劑很難被去除。?


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